Sự ổn định ELISA ≤ ± 0,003Abs Mycotoxin Tester ST-2000A Phạm vi bước sóng 400-900nm

Máy thử độc tố nấm mốc ST-2000A

Máy phân tích độc tố nấm mốc ST-2000A là một công cụ phân tích cần thiết để xét nghiệm chất hấp thụ miễn dịch liên kết với aflatoxin và enzyme. Nguyên lý của xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzyme (ELISA) pha rắn, cụ thể là xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzyme (ELISA), bao gồm dụng cụ này và bộ B1, có thể được sử dụng để xác định hàm lượng aflatoxin B1 và ​​các độc tố nấm mốc khác trong mẫu một cách hạn chế và định lượng (nếu trang bị các bộ dụng cụ khác có thể phát hiện được các chất độc khác). Nó được sử dụng rộng rãi trong việc phát hiện aflatoxin B1 và ​​các độc tố nấm mốc khác trong thực phẩm, thức ăn chăn nuôi, dầu, các sản phẩm từ sữa, thuốc, đồ uống, rượu vang và các sản phẩm khác.

Đặc tính hiệu suất:

1. Hoạt động hiển thị: màn hình LCD màu, bảng phân phối điện thoại video, hiển thị thông tin toàn bộ bảng, hoạt động trên màn hình cảm ứng

2. Chức năng tấm rung: Tốc độ tấm rung cấp 3, thời gian điều chỉnh 0-255 giây

3. Workstation: phần mềm đánh dấu enzyme chuyên nghiệp, có thể lưu trữ 500 nhóm chương trình, 100000 kết quả mẫu và cung cấp các chế độ tính toán phong phú như độ hấp thụ, phương trình tuyến tính, phương trình logarit, phương trình bậc hai, phương trình bậc ba, phương trình logarit nồng độ phần trăm độ hấp thụ, spline chức năng, tỷ lệ ức chế, vv

Thông số kỹ thuật:

Nguồn sáng: Đèn halogen nhập khẩu DC12V 22W

Phạm vi bước sóng: 400-900nm

Bộ lọc: 405, 450, 492, 630nm theo tiêu chuẩn, các bước sóng khác tùy chọn

Phạm vi đọc: 0－4.000Abs

Độ phân giải: 0,001Abs

Lỗi chỉ định: ≤ ± 0,01Abs

Độ ổn định: ≤ ± 0,003Abs

Độ lặp lại: 0,3%

Kích thước:400mm×260mm×200mm

1 Nguyên tắc và ứng dụng

Bộ sản phẩm này sử dụng phương pháp ELISA cạnh tranh gián tiếp để phát hiện aflatoxin B1 (AFB1) trong ngũ cốc, thức ăn và các mẫu khác. Bộ này bao gồm một tấm được dán nhãn enzyme được phủ sẵn kháng nguyên ghép, chất đánh dấu enzyme cải ngựa, kháng thể, thuốc thử chuẩn và các thuốc thử phù hợp khác. Trong quá trình xét nghiệm, thêm dung dịch chuẩn hoặc dung dịch mẫu, aflatoxin B1 trong mẫu và đĩa enzyme được phủ sẵn kháng nguyên liên hợp để cạnh tranh kháng thể kháng aflatoxin B1. Sau khi thêm chất đánh dấu enzyme, sử dụng chất nền TMB để phát triển màu sắc. Giá trị độ hấp thụ của mẫu có tương quan nghịch với hàm lượng aflatoxin B1 có trong mẫu. Lượng aflatoxin B1 còn sót lại trong mẫu có thể thu được bằng cách so sánh với đường chuẩn.

2 Chỉ báo kỹ thuật

2.1 Độ nhạy của bộ: 0,03ppb (ng/ml)

2.2 Chế độ phản ứng: 25oC, 30 phút ~ 15 phút

2.3 Giới hạn phát hiện dưới:

Ngũ cốc................................................................................. ..... 0,15ppb

Thức ăn công thức.................................. 0,3 ppb

Dầu ăn, dầu lạc.................................. 0,6ppb

Nước tương, lúa mì và các thức ăn chăn nuôi khác................................. 0,3 ppb

Bia.................................................0,3 ppb

Rượu vang, nước tương, dấm.................. 0,15ppb

2.4 Tốc độ phản ứng chéo:

Aflatoxin B1 100%

2.5 Tỷ lệ thu hồi mẫu:

Ngũ cốc và thức ăn công thức........... 85% ± 15%

Đậu phộng.......................................82 ± 15%

Dầu ăn.................................. 85 ± 15%

Nước tương, lúa mì và thức ăn chăn nuôi khác........... 83 ± 15%

Bia.......................................84 ± 15%

Rượu vang, nước tương, giấm............ 87 ± 15%

3 Thành phần bộ sản phẩm

Tấm đánh dấu enzyme.................................. 96 lỗ

Dung dịch chuẩn (nắp đen): mỗi loại 1ml

0ppb,0,03ppb,0,06ppb,0,12ppb,0,24ppb,0,48ppb

Dung dịch chuẩn cao: 100ppb................................. 1ml

Chất đánh dấu enzym (nắp đỏ)................................ 5.5ml

Dung dịch hoạt động kháng thể (nắp xanh)................................ 5,5ml

Dung dịch cơ chất A (nắp trắng)................................ 6ml

Chất lỏng B (nắp đen)................................ 6ml

Dung dịch chấm dứt (nắp vàng)................................ 6ml

Dung dịch rửa đậm đặc 20X (vỏ trắng)............ 40ml

Sách hướng dẫn sử dụng.......1 bản

4 Thiết bị và thuốc thử cần thiết

4.1 Thiết bị: Máy kiểm tra aflatoxin, máy in, máy đồng hóa, thiết bị sấy nitơ, máy dao động, máy ly tâm, pipet chia độ, cân (độ nhạy 0,01g)

4.2 Micro-pipet:đơn kênh 20 µl-200 µl, 100 µl-1000 µl, đa kênh 300 µl

4.3 Thuốc thử: metanol, n-hexan, triclometan hoặc diclometan

5 Tiền xử lý mẫu

5.1 Hướng dẫn trước khi xử lý mẫu:

Dụng cụ thí nghiệm phải sạch sẽ, sử dụng đầu hút dùng một lần để tránh nhiễm bẩn, ảnh hưởng đến kết quả thí nghiệm.

5.2 Chuẩn bị dung dịch:

Giải pháp 1: chiết mẫu

70% metanol, tức là V metanol: V nước khử ion＝7:3.

5.3 Các bước xử lý mẫu:

5.3.1 Phương pháp chế biến hạt

1) Cân 2g mẫu đã nghiền cho vào ống ly tâm 50ml, thêm 5ml dung dịch chiết mẫu, lắc trong 5 phút, tốc độ 4000 vòng/phút ở nhiệt độ phòng/10 phút ở tâm tách;

2) Lấy 0,5ml chất nổi phía trên, thêm 0,5ml nước khử ion và trộn đều;

3) Thực hiện phân tích 50 µL.

Tỷ lệ pha loãng mẫu: 5 Giới hạn phát hiện dưới: 0,15ppb

5.3.2 Phương pháp xử lý các mẫu có khả năng hút nước mạnh như vỏ ngô, cám lúa mì

1) Cân 2g mẫu đã nghiền cho vào ống ly tâm 50ml, thêm 20ml dung dịch chiết mẫu, lắc trong 5 phút, tốc độ 4000 vòng/phút ở nhiệt độ phòng/10 phút tại tâm tách;

2) Lấy 0,5ml chất nổi phía trên, thêm 0,5ml nước khử ion và trộn đều; (Đối với mẫu có hàm lượng độc tố cực cao có thể pha loãng bằng metanol 35% rồi đem đi xét nghiệm. Ví dụ lấy 0,1ml dung dịch đã pha làm 2) và 0,9ml metanol 35% để trộn. Tỷ lệ pha loãng mẫu cuối cùng là 200 và giới hạn phát hiện là 6ppb.)

3) Thực hiện phân tích 50 µL.

Tỷ lệ pha loãng mẫu:20 Giới hạn phát hiện dưới:0,6ppb

Lưu ý: Do độc tố phân bố trong mẫu không đồng đều nên cần lấy mẫu từ nhiều điểm và trộn đều trước khi lấy 2g xét nghiệm.

5.3.3 Phương pháp chế biến thức ăn công thức

1) Cân 2g mẫu đã nghiền cho vào ống ly tâm 50ml, thêm 10ml dung dịch chiết mẫu, lắc trong 5 phút, tốc độ 4000 vòng/phút ở nhiệt độ phòng/10 phút tại tâm tách;

2) Lấy 0,5ml chất nổi phía trên, thêm 0,5ml nước khử ion và trộn đều;

3) Thực hiện phân tích 50 µL.

Tỷ lệ pha loãng mẫu: 10 Giới hạn phát hiện dưới: 0,3ppb

5.3.4 Phương pháp xử lý thức ăn dầu ăn, đậu phộng và chất béo cao

1) Cân 2g mẫu đã nghiền cho vào ống ly tâm 50ml, thêm 8ml n-hexan và 10ml dung dịch chiết mẫu, lắc trong 5 phút, 4000 vòng/phút ở nhiệt độ phòng/10 phút tại tâm tách;

2) Loại bỏ chất lỏng phía trên, lấy 0,5ml chất lỏng phía dưới và thêm 0,5ml nước khử ion, trộn đều, sau đó lấy 0,5ml chất lỏng đã hỗn hợp và thêm 0,5ml metanol 35%, lắc trong 30 giây;

3) Thực hiện phân tích 50 µL.

Tỷ lệ pha loãng mẫu: 20 Giới hạn phát hiện dưới: 0,6ppb

5.3.5 Thực phẩm hoặc gia vị như nước sốt, lúa mì, bánh quy, bánh ngọt và các phương pháp chế biến thức ăn chăn nuôi như thức ăn đậm đặc

1) Cân 2g mẫu đã nghiền cho vào ống ly tâm 50ml, thêm 10ml dung dịch chiết mẫu, lắc trong 5 phút, tốc độ 4000 vòng/phút ở nhiệt độ phòng/10 phút tại tâm tách;

2) Lấy 2ml dịch nổi, thêm 4ml triclometan (hoặc diclometan), lắc trong 5 phút, 4000 vòng/phút ở nhiệt độ phòng/10 phút ở tâm tách;

3) Chuyển chất lỏng phía trên sang thùng chứa khác, để chất lỏng phía dưới ở chế độ chờ, thêm 4ml cloroform (hoặc dichloromethane) khác vào chất lỏng phía trên, lắc hoàn toàn và trộn trong 5 phút, nhiệt độ phòng là 4000 vòng / phút / trung tâm tách. 10 phút;

4) Loại bỏ chất lỏng phía trên, kết hợp chất lỏng phía dưới hai lần và trộn hoàn toàn;

5) Lấy 2ml chất lỏng kết hợp phía dưới và thổi khô dưới nitơ 50-60oC;

6) Thêm 0,5ml dịch chiết mẫu để hòa tan hoàn toàn chất khô, sau đó thêm 0,5ml nước khử ion vào trộn đều;

7) Thực hiện phân tích 50 µL.

Tỷ lệ pha loãng mẫu: 10 Giới hạn phát hiện dưới: 0,3ppb

5.3.6 Phương pháp chế biến bia

1) Khuấy đều bia (loại bỏ CO2), lấy 2ml mẫu bia, thêm 1ml nước cất, thêm 7ml metanol và lắc trong 5 phút;

2) Lấy 0,5ml dung dịch mẫu đã hỗn hợp thêm 0,5ml nước khử ion vào trộn đều;

3) Thực hiện phân tích 50 µL.

Tỷ lệ pha loãng mẫu: 10 Giới hạn phát hiện dưới: 0,3ppb

5.3.7 Phương pháp xử lý rượu, nước tương và giấm

1) Lấy 2ml mẫu, thêm 2ml nước cất, thêm 10ml triclometan (hoặc diclometan), lắc trong 5 phút, tốc độ 4000 vòng/phút ở nhiệt độ phòng/10 phút tâm tách;

2) Lấy 1ml chất lỏng phía dưới và thổi khô dưới nitơ 50-60oC;

3) Thêm 0,5ml dịch chiết mẫu để hòa tan hoàn toàn chất khô, sau đó thêm 0,5ml nước khử ion và trộn đều;

5) Thực hiện phân tích 50 µL.

Tỷ lệ pha loãng mẫu: 5 Giới hạn phát hiện dưới: 0,15ppb

6 bước ELISA

Lấy thuốc thử cần thiết ra khỏi môi trường bảo quản lạnh 4oC và đặt ở nhiệt độ phòng trong hơn 30 phút. Có thể có những tinh thể cần được phục hồi về nhiệt độ phòng để hòa tan hoàn toàn khi dung dịch rửa được bảo quản lạnh. Mỗi thuốc thử dạng lỏng phải được lắc trước khi sử dụng. Lấy số lượng tấm và khung vi mô cần thiết, cho những tấm vi xốp chưa sử dụng vào túi tự hàn kín và bảo quản ở nhiệt độ 2-8oC.

Trước khi thí nghiệm, dung dịch rửa đậm đặc 20 × được pha loãng 20 lần vào dung dịch rửa đang hoạt động.

6.1 Đánh số: đánh số thứ tự các giếng tương ứng của mẫu và chuẩn, tạo hai lỗ song song cho mỗi mẫu và chuẩn, ghi lại vị trí của lỗ chuẩn và lỗ mẫu.

6.2 Phản ứng thêm mẫu: thêm 50 µl/giếng chất chuẩn hoặc mẫu vào các giếng tương ứng, sau đó thêm 50 µl/giếng enzyme đánh dấu, sau đó thêm 50 µl/giếng dung dịch làm việc kháng thể, đậy kín đĩa bằng tấm đậy màng, lắc nhẹ trong 5 giây, trộn và phản ứng ở 25oC trong 30 phút.

6.3 Rửa: Cẩn thận tháo màng tấm che, làm khô chất lỏng trong lỗ, rửa hoàn toàn lỗ bằng dung dịch rửa đang hoạt động 250 µl/lỗ trong 5 lần, trong khoảng thời gian 30 giây và thấm khô bằng giấy thấm ( bong bóng không được loại bỏ sau khi vỗ có thể bị thủng bằng đầu súng sạch).

6.4 Hiện màu: thêm 50 µl dung dịch cơ chất A và 50 µl dung dịch cơ chất B vào mỗi lỗ, lắc nhẹ trong 5 giây và trộn đều, phát màu trong bóng tối ở 25oC trong 15 phút.

6.5 Kết thúc: thêm 50 µl dung dịch kết thúc vào mỗi lỗ, lắc nhẹ và trộn đều để kết thúc phản ứng.

6.6 Đo giá trị độ hấp thụ: sử dụng máy thử aflatoxin để đo giá trị độ hấp thụ của từng lỗ ở bước sóng 450 nm (nên sử dụng bước sóng kép 450/630 nm). Việc xác định phải được hoàn thành trong vòng 10 phút sau khi phản ứng kết thúc

6.7 Máy kiểm tra aflatoxin tự động ST-2000A tự động hoàn thành việc xác định và tự động đưa ra kết quả.